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INTRODUCCIÓN
La Stevia rebaudiana Bertoni es un arbusto perenne nativo de Paraguay. Produce edulcorantes bajos en calorías y de alta capacidad de endulzar en su tejido foliar. Este edulcorante fue utilizado durante siglos por los indígenas guaraníes para contrarrestar el sabor amargo de varias infusiones medicinales y bebidas vegetales. El botánico suizo Moisés Santiago Bertoni fue el primero en describir la planta en 1887 destacando su sabor dulce, y fue quien propuso su clasificación botánica en 1899. La segunda parte del nombre se le atribuye al químico paraguayo Ovidio Rebaudi, que en 1900 logró aislar los principios activos responsables del dulzor 1. Los componentes más importantes de Stevia rebaudiana Bertoni incluyen los glicósidos de esteviol, que gracias a su alto potencial edulcorante se puede agregar a los alimentos y bebidas; el esteviósido tiene un ligero sabor amargo, pero proporciona 250 a 300 veces mas dulzor que el azúcar 2).
Las hojas frescas de Stevia tienen un alto contenido de agua que va de 80 a 85% 3. La mayor concentración de esteviósido se encuentra justamente en las hojas, lo que sugiere que estas sirven como el principal tejido para la síntesis y acumulación primaria de glucósidos de esteviol 4.
Muchos países demostraron interés en el cultivo y comercialización de la Stevia. El creciente uso de steviósidos como edulcorante incentivó la expansión del cultivo a nivel mundial y particularmente en Paraguay, que ocupa el segundo lugar como productor detrás de China. El volumen de Stevia en miles de toneladas, producido por Paraguay en el año 2012 fue de 448, y de China 27.343 en el mismo año 5. Los principales mercados de steviósidos son varios países de Sudamérica, Japón, Estados Unidos y la Unión Europea.
Si bien las divisas ingresadas por las exportaciones de Stevia no son aún importantes frente a otros productos paraguayos tradicionales como la soja, las proyecciones para los próximos años son alentadoras 6. Al ser el volumen de producción importante, esto también genera una cantidad importante de residuos post selección y hojas secas, y la bibliografía sobre su uso alternativo o utilización en alimentación de rumiantes es escasa, por lo que surge interesante, en primer lugar su valoración química y en segundo lugar la valoración nutricional antes de recomendar su uso en la alimentación animal, que son los motivos que impulsaron a realizar este estudio, cuyo objetivo general fue valorar la digestibilidad in vitro y la composición química de los residuos post selección y las hojas secas utilizadas para extracción de steviósidos.
MATERIALES Y MÉTODOS
Animales y Alimentación
El experimento se llevó a cabo en el Departamento de Bromatología, Nutrición y Alimentación Animal, fueron utilizados dos animales de la especie ovina, machos enteros, mestizos, canulados en rumen, con 2 años de edad y peso vivo promedio de 44,5±1,06 kg de los que se extrajeron líquido ruminal para el estudio de la digestibilidad in vitro 7.
Los animales consumieron una ración constituida por 800 gr de heno de alfalfa y 200 g de Stevia rebaudiana Bertoni, ofrecidas una vez al día por la mañana a las 08:00 horas y agua a voluntad. Las muestras sometidas al estudio fueron: Hojas de primera calidad, secas que corresponden a las seleccionadas para extracción de steviósidos y los residuos de post selección o limpieza, que es lo que queda después de la selección de hojas de primera calidad y correspondieron a hojas no aptas para extracción u hojas de segunda que cayeron durante la desecación, y que no fueron aptas para extracción, estas muestras, podrían incluir tallos u hojas de plantas extrañas en pequeñas proporciones.
Procedimiento experimental
El experimento se inició con un periodo de adaptación a la dieta de los animales de 12 días, durante el cual los animales proveedores de líquido ruminal consumieron una parte de la dieta experimental (800 g de heno de alfalfa y 200 g de Stevia), y posterior a eso se estudió la digestibilidad in vitro, según método Tilley y Terry, 1963 que consistió de un periodo de incubación de 48 horas en líquido ruminal (extraído tras el acostumbramiento a la dieta con 12 horas de ayuno) en un medio Buffer correspondiente a la primera fase y una segunda de digestión en HCL-pepsina también por 48 horas. Las cantidades de MS y MO que desaparecen tras las incubaciones se consideran “digeridas”, y para valorarlas fueron incubadas 6 repeticiones por cada tipo de muestra.
Análisis Químicos
Las muestras estudiadas, previo a sus análisis químicos fueron secadas en estufa a aire forzado a 55°C por 48 hs y luego molidas en un molino martillo con un tamiz de 1 mm de diámetro. El análisis químico se realizó mediante métodos de la AOAC (2000) para MS, EE, y PB 8, para FND y FAD se midió en el ANKOM Fiber Analyzer con la técnica propuesta por Martens, 2002 9. La energía bruta se determinó mediante bomba calorimétrica adiabática (Plain Jacket Calorimeter 1341) y el contenido de CNF fue calculado por diferencia en base a análisis químicos individuales 10.
Cálculos
El porcentaje de digestibilidad de la Materia Seca (%DMSIV) y la Materia Orgánica y (% DMOIV) fueron calculados de la siguiente manera:
DMSIV: [Materia Seca Inicial- (Materia Seca Residual de la Muestra- Materia Seca residual del blanco) x 100] / Materia Seca Inicial.
DMOIV: [Materia Orgánica Inicial- (Materia Orgánica Residual de la Muestra- Materia Orgánica residual del blanco) x 100] / Materia Orgánica Inicial. El contenido de CNF se calculó con la siguiente ecuación: 100-NDF-ceniza-PB-EE.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Composición química
En la Tabla 1 se presenta la composición química del residuo post selección y hojas secas, siendo la MS en 1.88 % menor en el primero. En un estudio realizado por Gonzalez et al. 11 encontraron valores de MS que variaron entre 92,5 a 98,8 % en hojas de tres variedades de Stevia, valores que fueron un tanto superiores al del presente estudio.
Tabla 1. Composición Bromatológica de los residuos de limpieza y hojas secas
Materia Seca. 2 PS: Parcialmente Seca
En lo que se refiere a la PB los valores fueron casi idénticos, con un promedio de 15,48 %, bastante similar a los 16% en hojas reportados por Atteh, 2011. 12. Sin embargo, en otro experimento se reportó un valor promedio de 10,73 %, utilizando hojas secadas al sol 13.
Respecto a la FND y FAD, se registraron valores bastantes bajos en ambos tipos de muestras, lo que son indicativos de la baja proporción de pared celular en ambos casos.
En relación a los valores encontrados para EE, se puede apreciar que, en los residuos, es cerca del doble que en hojas, 10,15 vs 6,39 %, siendo este último valor similar a los 6,13 % hallados en un estudio sobre composición química y propiedades de las hojas de Stevia 13. Sin embargo, otros autores encontraron valores de EE más bajos que variaron desde 1,2 a 1,8 % en hojas de tres variedades de Stevia 11, de 1,9 % en otro caso 14; y un rango de 2,5 a 2,7 % en otros tres estudios (12, 15, 16). Esta diferencia en el porcentaje de EE podría deberse a las diferentes variedades de Stevia utilizadas en los experimentos. También la energía bruta fue mayor en Residuos post selección que en Hojas (4,3 vs 4,1 Mcal/kg MS). En fin, la diferencia en la composición química reportada por otros Autores, además de las diferencias de variedades podrían deberse al método de secado aplicado 17.
b. Digestibilidad in Vitro.
En la Tabla 2 se puede observar el % DMSIV y DMOIV tanto para los residuos de limpieza como para las hojas secas, notándose que los valores son muy similares especialmente para el primero, siendo los porcentajes de digestibilidad ligeramente menores en residuos de limpieza, lo que era de esperarse debido a la mayor proporción de EE y FND presente en el mismo y la mayor concentración de CNF presente en las hojas (9% más que en los residuos).
Tabla 2. Porcentaje de digestibilidad In Vitro de la Materia Seca y Materia Orgánica en residuos de post selección y hojas secas.
1: Digestibilidad in vitro de la Materia Seca
2: Digestibilidad in vitro de la Materia Orgánica
FEDNA (2016), utiliza el valor relativo del forraje (VRF), que supone un índice de la calidad forrajera que refleja tanto el potencial de ingestión como el potencial de digestibilidad, este índice permite calificar el forraje en Excelente (>151), de Primera (125-151), de Segunda (103-124), de Tercera (87-102), de Cuarta (75-86) y de Quinta categoría (>75) (20, 21). En el caso de los residuos de limpieza y las hojas secas de primera se puede observar en la Tabla 3 que su VRF es Excelente para ambos, y el potencial de digestibilidad es también alto. Si bien la información sobre composición química y la digestibilidad de la Stevia y las diferentes partes de la planta es escasa 18, los valores de digestibilidad son relativamente bajos si se tiene en cuenta su composición química, situación que pudiera deberse a la posible actividad antimicrobiana de los steviósidos y rebaudiósidos mencionada en un estudio 19. En coincidencia, otros autores manifiestan también la actividad antimicrobiana de la Stevia ante varios microorganismos como: B. subtilis; S. aureus; P. aeruginosa; A. niger. Si bien esta posible actividad antimicrobiana no actuaría sobre todas las bacterias del rumen, el que llegue a actuar sobre algunas cepas, hace suponer, que en general, habría un menor ataque microbiano y una menor digestibilidad.
CONCLUSIÓN
En base a los resultados se puede concluir que la composición química de los residuos post selección y las hojas secas son bastantes similares, siendo en el primero un poco más elevado en pared celular y más bajo en carbohidratos No fibroso, pero insuficiente para afectar a los coeficientes de digestibilidad.
Los valores de digestibilidad son relativamente menores a los esperados según su composición química y el valor relativo del forraje. Se recomienda continuar con estudios de la digestibilidad, pero ya realizadas de manera in vivo para avanzar en el potencial uso como alimentos para rumiantes.
