Memorias del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud

La Universidad Nacional de Asunción se abre a la virtualidad

The National University of Asuncion opens to Virtuality

A rapid and economic option for human papillomavirus detection by PCR in cervical samples with denaturing reagent

Trabajos han demostrado la utilidad de la captura híbrida II (CH IIâ) en la detección del virus de papiloma humano de alto riesgo oncogénico (HR-HPV) como método de tamizaje primario para detección de cáncer de cuello uterino, así como las bondades de la PCR que permite acceder a métodos de tipificación viral. Por ello el objetivo fue detectar el genoma del HPV por PCR a partir de muestras de CH IIâ cien veces diluidas. Estudio transversal en 141 muestras cervicales de mujeres con citología normal y anormal que concurrieron al IICS, UNA. Las muestras fueron procesadas por CH IIâ y almacenadas con reactivo desnaturalizante a -80ºC. Luego, las muestras fueron diluidas 100 veces con agua destilada y posteriormente procesadas por PCR. Se detectó HPV en 51% y 43% de las muestras analizadas por CH IIâ y PCR, respectivamente. Diecisiete de 23 muestras positivas por CH IIâ con carga viral relativa baja fueron negativas por PCR. Esto podría deberse a la degradación del material. Además, 6 muestras negativas por CH IIâ fueron positivas por PCR sugiriendo presencia de infección con tipos virales no incluidos en CH IIâ. Estos resultados sugieren que es posible realizar la detección de HPV por PCR en muestras procesadas por CH IIâ previa dilución. Esta propuesta rápida, sencilla y económica, minimiza el riesgo de perder el material genético en la extracción y permite acceder a métodos de tipificación viral que podrían contribuir con datos sobre tipos de HPV circulantes para realizar una vigilancia en la era post-vacunal.

Studies have demonstrated the usefulness of the hybrid capture II (CH IIâ) in the detection of oncogenic high risk human papillomavirus (HR-HPV) as a primary screening method for detection of cervical cancer, as well as the benefits of PCR that allows access to viral typing methods. The objective was to detect HPV by PCR from cervical samples processed by CH IIâ. It was a cross-sectional study including 141 cervical samples of women attending the IICS, UNA. The samples were processed by CH IIâ and stored with denaturing reagent at -80ºC. Then, they were diluted 100 times with distilled water and subsequently processed by PCR. HPV was detected in 51% and 43% of the samples analyzed by CH IIâ and PCR respectively. Seventeen of 23 positive samples by CH IIâ with relatively low viral load were negative by PCR. This could be due to degradation of the material. In addition, six negative samples by CH IIâ were positive by PCR suggesting the presence of infection with HPV types not included in CH IIâ. These results suggest that it is possible to detect HPV by PCR from samples processed by CH IIâ prior dilution. This is a quick, easy and economic alternative which minimizes the risk of losing the genetic material in the extraction process, and allows access to viral typing methods that could provide data about circulating HPV types to carry out surveillance in the post- vaccine era.

Diagnosis of the Organizational Climate in the Central Hospital of the Armed Forces of Paraguay

El clima organizacional se considera un factor que refleja las facilidades u obstáculos que encuentra el trabajador en el contexto laboral. Es importante determinar el grado de satisfacción del trabajador en una organización de manera a realizar intervenciones efectivas si fuera necesario que mejoren las condiciones laborales, de manera a optimizar la productividad. En Paraguay pocos trabajos han caracterizado el clima organizacional de un hospital y ninguno de un hospital militar, por lo que se realizó este estudio para determinar la percepción del clima organizacional en sus diversas dimensiones del personal sanitario y administrativo del Hospital Central de las Fuerzas Armadas de Paraguay en el año 2012. Estudio observacional descriptivo de corte transversal con componente analítico, en una muestra por conveniencia de 226 trabajadores del mencionado hospital. La recolección de los datos se realizó mediante una encuesta autoadmistrada, utilizándose el cuestionario recomendado por la OPS "Inventario de clima organizacional", que consta de 80 ítems distribuidos en cuatro dimensiones, motivación, liderazgo, participación y reciprocidad, además de datos socio-demográficos y laborales del personal. El 55% del personal encuestado declaró nivel de insatisfacción en la dimensión motivación, en la dimensión reciprocidad 53% y en participación 32%, además hubo un alto porcentaje de riesgo de insatisfacción (83%) en liderazgo y en participación (68%). Se obtuvieron niveles insatisfactorios en todas las dimensiones estudiadas relacionadas al clima organizacional en el personal del Hospital Militar. Es necesario que se tomen medidas pertinentes que ayuden a mejorar la percepción de los empleados hacia la organización del hospital.

The organizational climate is considered a factor that reflects the eases or obstacles found by the worker in the working environment. It is important to determine the employee satisfaction level in an organization to make effective interventions to improve working conditions if necessary and optimize productivity. Very few studies in Paraguay have characterized the organizational climate of a hospital and none of a military hospital. Thus, this study was conducted to determine the organizational climate with its various dimensions, perceived by medical, nursing, paramedical and administrative staff of the Central Hospital of the Armed Forces of Paraguay in 2012. This observational cross-sectional descriptive study with analytical component included a sample of 226 workers of the hospital. The data collection was performed by a self administered survey, using the PAHO "Organizational climate inventory" tool, which consists of 80 items divided into four dimensions, motivation, leadership, participation and reciprocity. Additionally, socio-demographic and labor data from the personnel were recorded. Fifty five percent of the personnel claimed dissatisfaction in the motivation dimension, 53% in reciprocity and 32% in participation as well as a high percentage in the dissatisfaction risk in leadership (83%) and participation (68%). Unsatisfactory levels were obtained in all studied dimensions related to organizational climate on the staff of the Military Hospital. It is urgent to take some pertinent interventions in order to change the employee perception of the hospital organization.

Frecuencia de insuficiencia de Vitamina D en adultos jóvenes sanos de Asunción: Frequency of Vitamin D insufficiency in healthy young adults of Asunción

La insuficiencia de vitamina D sérica se asocia a diversos trastornos, con alta prevalencia a nivel regional y mundial. En nuestro país no existen estudios publicados al respecto. En este estudio observacional, descriptivo, con componente analítico se determinaron niveles de vitamina D y prevalencia de su insuficiencia en jóvenes y se indagó posibles asociaciones con factores de riesgo conocidos como la falta de exposición solar, uso de protectores solares, y falta de consumo de alimentos ricos en vitamina D. Fueron incluidos 100 estudiantes y funcionarios del Hospital de Clínicas de la Universidad Nacional de Asunción, a quienes se les tomó una muestra de sangre y llenaron un cuestionario. Los niveles de vitamina D fueron determinados por el método ECLIA (inmunoensayo de electroquimioluminiscencia). Las edades estaban entre 20 y 30 años, el 69% era del sexo femenino. La concentración media ± desvío estándar de vitamina D fue de 17,6 ± 6,25 ng/dl (rango: 4-38). El 53% de los participantes presentaba insuficiencia (10 a 20 ng/dL) y 11% deficiencia (<10 ng/dL) de vitamina D. Aunque los participantes que reportaron consumir lácteos y no utilizar protectores solares tuvieron mayores niveles de vitamina D, la diferencia no fue estadísticamente significativa. Se encontró una frecuencia elevada de insuficiencia de vitamina D en esta población, en concordancia con los hallazgos de estudios similares a nivel mundial y regional. Se recomienda la suplementación con vitamina D en la población de manera a prevenir los trastornos asociados con la deficiencia de esta vitamina.

Insufficient serum vitamin D is associated with various disorders with high prevalence at global and regional levels. In our country, there are not published studies related to this matter. In this descriptive, observational study with analytical component, the levels of vitamin D and the prevalence of its insufficiency were determined in young people and also the possible associations with known risk factors like sun exposure, sunscreen use and lack of consumption of vitamin D-enriched foods were analyzed. One hundred medical students and members of the staff of the Hospital de Clinicas of the National University of Asuncion, Paraguay were included. Participants were aged 20 to 30 years and 69% of them were women. The mean concentration of vitamin D was 17.6 ± 6.25 ng/dl (range: 4-38); 53% of the participants had insufficient levels of vitamin D (10-20 ng/dL) and 11% had vitamin D deficiency (less than 10 ng/dL). Although the individuals who reported consumption of dairy products and non-use of sunscreen had higher levels of vitamin D, the difference was not statistically significant. A high frequency of vitamin D insufficiency was found in this population in agreement with similar studies carried out at worldwide and regional levels. Vitamin D supplementation is recommended in the population to prevent disorders associated with the deficiency.

**Anti-fungal susceptibility profile of Candida spp isolates by the microdilution method. New cutoff points for fluconazole**

Las infecciones por levaduras tienen gran importancia debido a su relativa alta frecuencia e incremento de la resistencia a los antifúngicos, especialmente a los derivados azólicos y, en particular, al fluconazol. El objetivo del estudio fue determinar la concentración inhibitoria mínima (CIM) del fluconazol y anfotericina B de aislados de Candida de pacientes ambulatorios y hospitalizados en Paraguay de mayo del 2010 a agosto del 2011, aplicando criterios nuevos y antiguos para el fluconazol. La CIM de los anti-fúngicos se determinó por el método de microdilución según la CLSI. Fueron incluidos 50 aislados de Candida, resultando predominante C. albicans (40%) seguido de C. parapsilosis y C. glabrata en igual proporción (20%), C. tropicales(16%) y C. krusei(4%). Con el antiguo criterio, cinco aislados resultaron resistentes al fluconazol (10%), dos fueron C. krusei con resistencia natural, dos C. tropicalis y uno C. albicans. Tres aislados tuvieron sensibilidad dosis dependiente (SDD), uno de cada especie de C. tropicales, C. parasilopsis y C. glabrata. Con el nuevo criterio, la resistencia aumentó a siete aislados (14%), dos de los cuales fueron clasificados previamente como SDD. Los nueve aislados de C. glabrata y dos de C. albicans de sensibles pasaron a SDD. Todos resultaron sensibles a anfotericina B. Con los nuevos puntos de corte hubo una variación importante en el perfil de sensibilidad, especialmente de C. glabrata, que apoya la necesidad de identificar especies, mantener una vigilancia constante de la resistencia a los anti fúngicos y correlacionar los resultados de sensibilidad con las respuestas clínicas al tratamiento.

Yeast infections are very important because of their relatively high frequency and increased resistance to antifungal agents, especially to azole derivatives, and in particular, to fluconazole. The objective of this study was to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of fluconazole and amphotericin B in Candida isolates in clinically significant samples from hospitalized patients in Paraguay from May 2010 to August 2011 using the old and new criteria for fluconazole. The MICs of the antifungals were determined by the microdilution method (M27 A-2) according to CLSI recommendations. Fifty isolates were evaluated, being C. albicans the predominant species (40%) followed by C. parapsilosis and C. glabrata in equal proportion (20%), C. tropicalis (16%) and C. krusei (4%). Using the old cutoff, five isolates were resistant to fluconazole (10%), two naturally resistant isolates (C. krusei), two C. tropicalisand one C. albicans. Three C. glabrata and one isolates of each species of C. tropicales, C. parasilopsis y C. glabrata showed sensitivity dose dependent (SDD). With the new cutoff, the number of resistant isolates increased to seven (14%), of which two were SDD based on the old criteria. Nine C. glabrata and two C. albicans,previously classified as sensitive, changedto SDD. All isolates were susceptible to amphotericin B. With the new cutoff points, important variations were observed in the isolates susceptibility profiles, particularly in C. glabrata, supporting the need of species identification, permanent surveillance of the isolates resistance to anti-fungals and correlation of the sensitivity results with the clinical response to treatment.

Frequency of dislipidemia and nutritional state in schoolchildren of Paraguayan rural areas

Mundialmente la prevalencia de dislipidemias ha crecido en la última década en niños y adultos. En nuestro país las enfermedades circulatorias son la primera causa de muerte. Se determinó la frecuencia de dislipidemia, estado nutricional y factores asociados a dislipidemia en escolares de cuatro escuelas rurales públicas. Estudio observacional descriptivo de corte transverso en una población de escolares de 5 a 13 años de edad, de ambos sexos, con muestreo de casos consecutivos, realizado entre abril de 2008 a setiembre de 2009. Se determinó el estado nutricional por IMC según CDC 2000 y los niveles de colesterol y triglicéridos en sangre por métodos enzimáticos. A través de una encuesta, se consultaron los antecedentes familiares de dislipidemia, actividad física y hábitos alimentarios. El 59% de los 182 escolares incluidos en el estudio presentaron dislipidemia, 33% niveles de colesterol de riesgo moderado o alto, 41% niveles de triglicérido de riesgo moderado o alto. El 8% de los escolares mostró sobrepeso u obesidad. En cuanto a factores de riesgo asociados a dislipidemia, el 60% consumía carnes no magras al menos dos o tres veces por semana y el 56% de los niños que poseían padres con antecedentes de dislipidemia presentaban hipercolesterolemia de riesgo. La prevalencia de dislipidemia en esta población es preocupante y por ello, es necesario introducir estrategias dirigidas a mejorar los hábitos alimenticios en las instituciones educativas.

The worldwide prevalence of dislypidemia in children and adults has increased in the last decade. In our country, circulatory diseases are the first cause of death. The frequency of dislypidemia, nutritional state and factors associated to dislypidemias in schoolchildren of four public rural schools was determined. This was a cross-sectional descriptive observational study with consecutive sampling carried out in a population of schoolboys and girls aged 5 to 13 years old from April 2008 to September 2009. The nutritional state was determined by BMI according to CDC 2000 and colesterol and triglycerides blood levels by enymatic methods. A survey collected family backgrounds about dislypidemia, physical activity and food habits. Fifty nine percent of the 182 schoolchildren included in the study presented dislypidemia, 33% had moderated or high risk for colesterol levels and 41% moderated or high risk for triglycerids levels while 8% had overweight or obesity. In relation to risk factors associated to dislypidemia, 60% ate lean meat at least two to three times a week and 56% of the children, who had parents with dislypidemia backgrounds, showed risk hipercholesterolemia. The prevalence of dislypidemia found in this population is worrisome showing that it is necessary to introduce educational strategies aimed at improving food habits in the educational institutions.

Cystine lithiasis: Case report

La cistinuria es una enfermedad genética cuya expresión clínica es la formación de cálculos en las vías urinarias. Si bien este tipo de litiasis es poco frecuente se caracteriza por un elevado número de recidivas. En este trabajo, presentamos el caso de una paciente de 24 años con litiasis por cistina, en la que el diagnóstico se logró mediante el hallazgo de cristales de cistina en muestras de orina y la presencia de cistina como único componente de los cálculos expulsados espontáneamente en dos ocasiones y removidos por nefrolitotomía percutánea en una ocasión en un lapso de 6 meses. El tratamiento instaurado consistió en aumento de la ingesta de líquido, dieta con restricción de sodio y proteínas y administración de agentes alcalinizantes para aumentar el pH de la orina. Así mismo queremos mostrar la disponibilidad y el uso a nivel nacional de técnicas laboratoriales especializadas para el diagnóstico y seguimiento de pacientes con cistinuria.

Cystinuria is a genetic disease which clinical expression is the formation of stones in the urinary tract. Even though this kind of lithiasis is rare, it is characterized by a high recurrence rate. In this work, we present the case of a 24-year-old female patient with cystine lithiasis in whom the diagnosis was made by detection of cystine crystals in urine samples and the presence of cystine as the only component of kidney stones spontaneously passed in two episodes and removed by percutaneous nephrolithotomy once in a period of six months. The treatment measures established were increase of the fluid intake, restricted protein and sodium diet and administration of alkaline agents to increase urinary pH. We also show the availability and use at national level of specialized laboratory techniques for the diagnosis and follow-up of cystinuric patients.