Memorias del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud

Multiplex PCR for simultaneous detection of mecA and pvl genes in Staphylococcus spp

Este estudio observacional descriptivo de corte transverso tuvo por objetivo estandarizar una PCR múltiple para la detección simultánea de los genes mecA y pvl en Staphylococcus spp. Se emplearon como cepas control: S. aureus ATCC 25923, S. aureus ATCC 43300 y un aislado de S. aureus portador de los genes mecA y pvl. La extracción de ADN se realizó por el método de ebullición. El límite de detección se estableció por medio de diluciones seriadas de ADN. Se determinó la aplicabilidad de la PCR múltiple testando 41 aislados de S. aureus y 51 Estafilococos coagulasa negativo (ECN) previamente caracterizados por métodos fenotípicos en noviembre del año 2009. Los productos de PCR fueron visualizados por electroforesis en gel de agarosa al 2% previa tinción con bromuro de etidio. Los productos de amplificación de la PCR múltiple presentaron tamaño esperado de 533pb y 433pb para los genes mecA y pvl respectivamente, con límites de detección de hasta 0,5 ng/µL. El gen mecA se detectó en 13 (31,7%) aislados de S. aureus y en 29 (56,7%) ECN. El gen pvl se detectó en 2 (4,9%) S. aureus y no fue detectado en ECN. La presencia del gen mecA tuvo 100% de concordancia con los métodos fenotípicos. Esta técnica es una herramienta útil en la confirmación de cepas de Estafilococos meticilino resistentes e identificación del gen pvl, además de ser relativamente sencilla con la ventaja de detectar ambos genes en una sola reacción.

The aim of this cross sectional observational study was to standardize a multiplex PCR for simultaneous detection of mecA and pvl genes in Staphylococcus spp. S. aureus strains ATCC 25923 and S.aureus ATCC 43300 were used as controls as well as an isolate of S. aureus carrying mecA and pvl genes. The boiling method was performed for DNA extraction and the detection limit was established by serial dilutions of DNA. We determined the applicability of the multiplex PCR by testing 41 isolates of S. aureus and 51 coagulase negative staphylococci (CNS) previously characterized by phenotypic methods in november 2009. The PCR products were visualized by agarose gel electrophoresis in 2% after ethidium bromide staining. The size of the amplified products of the multiplex PCR corresponded to those expected, 433bp for mecA and 533bp for pvl, with detection limits up to 0.5 ng/µL. The mecA gene was detected in 13 (31.7%) isolates of S. aureus and 29 (56.7%) CNS. The pvl gene was detected in 2 (4.9%) isolates of S. aureus and was not detected in CNS. A 100% concordance was obtained between the presence of mecA and phenotypic methods. This technique is a useful tool in the confirmation of methicillin-resistant Staphylococcus strains and identification of the pvl gene, in addition to being relatively simple, with the advantage of detecting both genes in a single reaction.

**Characterization of Leishmania strains using PCR-RFLP of Spliced Leader Miniexon(SLME) in human and canine isolates in Paraguay**

La leishmaniosis es una enfermedad parasitaria con varias formas clínicas, desde lesiones cutáneas leves hasta enfermedades fatales con comprometimiento visceral. Existen varias técnicas moleculares como por ejemplo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) que amplifica diferentes secuencias blanco, una de ellas es la región SLME (spliced leader miniexon), el producto se corta con enzimas de restricción (PCR-RFLP), permitiendo la identificación de las especies de Leishmania. Este trabajo fue realizado con el objetivo de caracterizar las cepas de Leishmania, empleando una PCR-RFLP de la región SLME, aisladas de humanos y caninos, provenientes de distintas zonas del país. Se analizaron 12 aislados de humanos y 40 de caninos debidamente codificados. Se empleó un par de cebadores para la región SLME, los productos amplificados fueron cortados con las enzimas Hae III y Nco I (RFLP) y los patrones de bandas analizados. Se detectó en un primer paso la presencia de parásitos del subgénero Viannia en 7 aislados de humanos y correspondientes al subgénero Leishmania en 5 aislados de humanos y 40 de caninos. La RFLP según los patrones de bandas permitió identificar a L. braziliensis en aislados de leishmaniosis tegumentaria y L. chagasi en los casos de leishmaniosis visceral. Es importante resaltar que este trabajo es el primero en el país en realizar la caracterización molecular a nivel de especies de Leishmania y los hallazgos descritos tienen una implicación a nivel epidemiológico, contribuyendo con las estrategias de vigilancia y control de la enfermedad. Adicionalmente, se sugiere el uso de otros marcadores genéticos para identificar genotipos o perfiles genéticos diferentes, entre cepas de estas especies.

Leishmaniasis is a parasitic disease with various clinical forms from minor skin lesions to fatal diseases with visceral compromise. There are several molecular techniques such as the polymerase chain reaction (PCR) that amplifies specific target sequences like the SLME(spliced leader miniexon) region. Subsequently, the PCR products are digested with specific restriction enzymes (PCR-RFLP) allowing the identification of Leishmania species. This study was carried out in order to characterize Leishmania strains by using a PCR-RFLP of the SLME region in human and canine isolates from different regions of the country. We analyzed 12 human isolates and 40 dog isolates properly codified. Two primers for SLME region were used and the amplified products were digested with the Hae III and Nco I (RFLP) enzymes, then the banding patterns were analyzed. In 7 human isolates, parasites from the Viannia subgenus were detected while in 5 human isolates and 40 dog isolates, parasites from the Leishmania subgenus were identified. RFLP, according to the restriction banding patterns, allowed the identification of L. braziliensis species in the tegumentary leishmaniasis isolates and L. chagasi in visceral leishmaniasis isolates. This is the first study conducting molecular characterization of Leishmania species in the country, and its findings have implications at the epidemiological level by contributing to the improvement of surveillance strategies for the disease control. Additionally, the use of other genetic markers is suggested in order to identify genotypes or different genetic profiles among the strains of these species.

Multiplex PCR for detection of atypical bacteria in community-acquired pneumonia patients attending INERAM Hospital

La neumonía adquirida en la comunidad (NAC) es una causa relevante de morbilidad y mortalidad. Los métodos convencionales fracasan en la detección de Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae y Legionella pneumophila. Estas bacterias pueden generar procesos infecciosos crónicos y no responden a ciertos antibióticos empleados en el tratamiento empírico de la NAC. Nuestro objetivo fue detectar de forma simultánea, mediante métodos moleculares, M. pneumoniae, C. pneumoniae y L. pneumophila en muestras respiratorias de pacientes con NAC, y describir los gérmenes comunes aislados por métodos microbiológicos convencionales. Estudio observacional descriptivo de corte trasverso realizado en el año 2011, en el que se analizaron 60 muestras respiratorias provenientes de pacientes con NAC atendidos en el INERAM (Instituto de Enfermedades Respiratorias y del Ambiente). Para la PCR múltiple se emplearon primers específicos para genes de los tres microorganismos citados. El protocolo de estudio fue aprobado por los comités científico y ético del IICS y se mantuvieron en estricta confidencialidad los datos personales de los pacientes. La PCR múltiple permitió la amplificación de los genes específicos de estos microorganismos con límites de sensibilidad comprendidos entre 0,05 y 0,001 ng/µL de ADN. M. pneumoniae y C. pneumoniae estuvieron presentes respectivamente en el 18,3% y 1,7% del total de muestras analizadas. No se detectó la presencia de L. pneumophila. Los gérmenes comunes más frecuentemente aislados fueron estreptococos del grupo viridans y Candida spp.La técnica de PCR múltiple permitió detectar M. pneumoniae, C. pneumoniae y L. pneumophila, siendo el primero de los tres el más frecuentemente detectado en pacientes con NAC.

The community-acquired pneumonia (CAP) is a major cause of morbidity and mortality. Conventional methods fail detecting Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae and Legionella pneumophila. These bacteria can cause chronic infectious processes and do not respond to certain antibiotics used in the empirical treatment of CAP. Our objective was to detect M. pneumoniae, C. pneumoniae and L. pneumophila simultaneously using molecular methods in respiratory samples from CAP patients, and describe common germs isolated by conventional microbiological methods. This was a cross-sectional descriptive observational study carried out in 2011, which analyzed 60 respiratory samples from CAP patients treated at INERAM (National Institute of Respiratory and Environmental Diseases). For multiplex PCR, specific primers were used for the genes of the three mentioned microorganisms. The study protocol was approved by the scientific and ethical committees of the IICS and the personal data of the patients were strictly confidential. The multiplex PCR allowed the specific amplification of the genes of these microorganisms with sensitivity limits between 0.05 and 0.001 ng/µL of DNA. M. pneumoniae and C. pneumoniae were present in 18.3% and 1.7% respectively of all samples analyzed while L. pneumophila was not detected. The microorganisms most commonly isolated were streptococci from the viridans group and Candida spp. The multiplex PCR allowed the detection of M. pneumoniae, C. pneumoniae and L. pneumophila, being the first of the three the most frequently detected in CAP patients.

Efficacy of the use of the intragastric balloon in the temporary control of obesity in Paraguay

El balón intragástrico es un procedimiento no quirúrgico indicado para el control de la obesidad. En el presente estudio se describe la experiencia de los primeros 100 casos en Paraguay, donde se estima un 32% de obesidad en la población urbana. El objeto de estudio fue determinar la eficacia del balón intragástrico en el descenso ponderal y de circunferencia de cintura de los pacientes obesos sometidos a este tratamiento. Desde octubre del 2004 hasta diciembre de 2008 se han sometido 100 pacientes obesos a la colocación del balón intragástrico luego de una evaluación clínica, sicológica y nutricional. Recibieron dieta hipocalórica e indicación de actividad física diaria. En el análisis de los resultados los valores de peso disminuyeron significativamente después de la intervención siendo los valores de la mediana de 112 (IC 95%: 96,4 a 113,9 Kg; p< 0,0001) a nivel inicial y de 88(IC 95%: 80,0 a 89,3) a nivel final, dándonos una diferencia neta de 24 Kg en un periodo de seis a ocho meses. En cuanto al índice de masa corporal (IMC), el cambio observado fue un grado de obesidad de diferencia, pasando de obesidad mórbida y grado III a obesidad grado II y I. Los valoresfueron los siguientes: mediana de 38 Kg/m2 (IC 95%: 36,4 a 39,9) en el nivel inicial y en elfinal, mediana de 31,0 Kg/ m2 (IC 95% 29,4 a 33,9). Los resultados muestran una pérdida significativa de peso, IMC y diámetro de cintura. Esto se logra combinando el balón intragástrico, dieta restringida y terapia de apoyo conductual.

The intragastric balloon is a non-surgical procedure indicated for the control of obesity. It is considered more efficient than the conservative treatment, which has less risk than the surgery, but there is still a lack of consensus about its indications and there is little information about its limitations. The present study describes the experience of the first 100 cases in Paraguay where 32% of obesity is estimated in the urban population. The objective of this study was to determine the efficacy of the intragastric balloon in the decrease of the weight and waist circumference of obese patients subjected to this treatment. Since October 2004 to December 2008, 100 patients were subjected to the placing of an intragastric balloon after a clinical, psychological and nutritional evaluation. They received a hypocaloric diet and indications of daily physical activity. Seventy six women with a mean age of 36±21 years and 24 men with a mean age of 37±19 years were evaluated. The initial weight was 105±23 kg in women and 134±27 kg in men, presenting a waist diameter above the normal values (110 and 132 cm respectively), a mean weight of 112±23 kg, a BMI of 40 and waist diameter of 115 cm. In the result analysis, the weight values decreased significantly after the surgery being the median values 112 (IC 95%: 96.4 to 113.9 kg; p< 0.0001) at initial level and 88 (IC 95%: 80.0 a 89.3) at final level providing a net difference of 24 kg in a period of six to eight months. In relation to the body mass index (BMI), the change observed was one obesity degree of difference going from morbid obesity and grade III to obesity grades II and I. The values were the following: median of 38 kg/m2 (IC 95%: 36.4 to 39.9) at the initial level and median of 31.0 kg/m2 (IC 95% 29.4 to 33.9) at the final level. The results show significant losses of weight, BMI and waist diameter. This can be achieved combining the intragastric balloon, restricted diet and behavioral support therapy. The waist diameter, a very important risk factor for cardiovascular disease, showed an important decrease.

Clinical-demographic characteristics and typification of the human papilloma virus in Paraguayan women with negative citology for squamous intraepithelial lesion

Paraguay posee una alta tasa de incidencia de cáncer de cuello uterino de 35/100.0000 mujeres en el año 2008 y el virus de papiloma humano (HPV) es su agente causal. La planificación de medidas de prevención puede ser beneficiada con conocimientos sobre los tipos virales, por ello, el objetivo de este estudio fue determinar características clínico-demográficas y los tipos de HPV presentes en mujeres con citología negativa para lesión escamosa intraepitelial. Estudio de corte transverso con componente analítico en 207 mujeres con citología negativa para lesión escamosa intraepitelial provenientes de centros de salud de Asunción. La tipificación fue realizada por reacción en cadena de la polimerasa utilizando cebadores MY09/11 y GP5/GP6, seguida de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción e hibridación lineal reversa, respectivamente. La asociación entre HPV y las características clínico-demográficas fue determinada por análisis de Chi cuadrado (EpiInfo versión 3,2). Se detectó alta frecuencia de HPV (21%), siendo el tipo predominante HPV 16 (4,3%) seguido de HPV 58/31 (2,4% cada uno). Se observó asociación entre la presencia de HPV y la edad (p=0,0002), detectándose mayor frecuencia de HPV en mujeres menores a 30 años, la cual, disminuyó al aumentar la edad, presentando un ligero aumento en mujeres de 60 años o más. En conclusión, los datos muestran una alta frecuencia de HPV y HPV 16 en mujeres menores a 30 años con citología negativa y sugieren la necesidad de realizar control posteriormente, a fin de identificar las infecciones persistentes que podrían causar lesión de cuello uterino.

Paraguay has a high incidence of cervical cancer in women of 35/100,0000 in 2008 and the human papilloma virus (HPV) is the causative agent. The planning of preventive measures can be benefited by the knowledge of the viral types. Therefore, the aim of this study was to determine the clinical and demographic characteristics of the HPV types present in women with negative cytology for squamous intraepithelial lesion. This was a cross-sectional study with an analytical compound in 207 women with negative cytology for squamous intraepithelial lesion from health centers in Asunción. The typification was performed by polymerase chain reaction using MY09/11 and GP5/GP6 primers, followed by restriction fragment length polymorphism and reverse linear hybridization. The association between HPV and clinical-demographic characteristics was determined by chi-square analysis (EpiInfo version 3.2). A high frequency of HPV (21%) was detected being the predominant type HPV 16 (4.3%) followed by HPV 58/31 (2.4% each). An association between the presence of HPV and age was observed (p=0.0002) and a higher frequency of HPV in women younger than 30 years was detected which decreased when age increased, showing a slight increase in women of 60 years or more. In conclusion, the data show a high frequency of HPV and HPV 16 in women under 30 years of age with negative cytology and suggest a need for further monitoring in order to identify persistent infections that could cause cervical lesion.

**Molecular identification of Trypanosoma cruzi lineages and sub lineages in congenitally infected children from endemic areas of Paraguay**

La tripanosomiasis americana es una infección causada por un protozoario flagelar Trypanosoma cruzi que está diseminado por todo el continente Americano. T. cruzi es una especie heterogénea que comprende varias sub-poblaciones que circulan en hospederos vertebrados domésticos y salvajes, e invertebrados. Esta diversidad genética ha sido detectada con técnicas moleculares demostrándose que circulan clones mayoritarios en varios hospederos y en diferentes áreas geográficas de América Latina. Aislados de T. cruzi han sido divididos en dos grupos genéticos nombrados por consenso internacional T. cruzi I (linaje 2-asociado al ciclo enzoótico) y T. cruzi II (linaje 1-asociado al ciclo doméstico). La interacción de los clones infectivos de T. cruzi y el hospedero humano podrían determinar la morbilidad de la enfermedad. En este trabajo se empleó la técnica PCR para amplificar genes constitutivos de T. cruzi, como el gen 24Sa Ribosomal y el gen mini exón (ME) y se detectaron linajes de T. cruzi en 112 muestras (83%) de un total de 135 muestras de niños infectados provenientes de dos departamentos endémicos para la enfermedad de Chagas en Paraguay(Cordillera y Paraguarí). En cuanto a la procedencia de las mismas, 53 muestras eran de Paraguarí y 59 muestras de Cordillera. Los sub-linajes encontrados fueron: Paraguarí: 34TcIIc, 17 TcIId, 1 muestra TcIIb-IIe y 1 muestra ND (no determinada), En Cordillera: 37 TcIIc, 19 TcIId, 1 muestra TcIIb-IIe y 2 muestras no determinadas. No se encontró linaje I, selvático en ninguna de las 2 áreas estudiadas.

American trypanosomiasis is an infection caused by the protozoan flagellate Trypanosoma cruzi that is spread throughout the Americas. T. cruzi is a heterogeneous species comprising several sub-populations circulating in domestic and wild vertebrate and invertebrate hosts. This genetic diversity has been detected with molecular techniques showing that there are major clones circulating in several hosts and different geographic areas of Latin America. T. cruzi isolates have been divided into two genetic groups named by an international consensus as T. cruzi I (lineage 2-associated with enzootic cycle) and T. cruzi II (lineage 1-associated with the domestic cycle). The interaction of infective clones of T. cruzi and human host could determine the morbidity of the disease. In this work, we used PCR technique to amplify constitutive genes of T. cruzi, 24Sa ribosomal gene and the mini exon (ME) gen. Lineages of T. cruzi were detected in 112 samples (83%) out of 135 samples of infected children from two Departments of Paraguay that are endemic for Chagas disease (Cordillera and Paraguarí). Regarding their origin, 53 samples were from Paraguarí and 59 samples from Cordillera. The sub-lineages found in Paraguarí were: 34TcIIc, 17 TcIId, 1 TcIIb-IIe and 1 ND sample (not determined). In Cordillera: 37 TcIIc, 19 TcIId, 1 TcIIb-IIe and 2 ND samples. Wild lineage I was not found in any of the two areas studied.

Methanol concentration in Paraguayan caña in samples remitted to the National Institute of Technology, Standardization and Metrology, during the 2007-2010 period from three departments and the capital

La caña paraguaya es la bebida alcohólica tradicional del Paraguay, con graduación alcohólica de 35%(mínimo) a 45%(máximo) en volumen a 20 ºC (o 35º a 45º Gay Lussac) preparada exclusivamente por fermentación de la melaza de caña de azúcar (Saccharum officinarum) y obtenida a partir de su destilado con posterior dilución. De acuerdo a la Norma paraguaya de caña NP 3 001 84 (Junio /2010 Tercera Edición), la caña paraguaya debe tener ciertas características de conformidad para su consumo en humanos. Existen compuestos volátiles con acciones tóxicas y/o organolépticas con parámetros mínimos y máximos de aceptabilidad, entre los que se encuentra el metanol, cuya concentración máxima permitida es de 10 mg% expresada en alcohol anhidro (equivalente a 10 mg /dL). Con el propósito de contribuir al control de calidad de la caña paraguaya, en este estudio se cuantificó metanol en muestras de la citada bebida. Se identificaron los distritos con mayor concentración de metanol en caña en 3 departamentos de nuestro país (Central, Cordillera y Paraguarí) y en el municipio Capital. El metanol fue cuantificado por cromatografía gaseosa en los Laboratorios del Organismo de Investigación y Asistencia Tecnologica (OIAT) del Instituto Nacional de Tecnología, Normalización y Metrología (INTN). El promedio de metanol en caña fue de 3,78 mg/dL (Desviación estándar: 5,80 n: 48) hallándose valores fuera de lo permitido en 6 de 48 cañas provenientes de distritos del departamento de Cordillera y de municipio Capital. Deben analizarse la toxicidad de otros compuestos de la caña paraguaya para asegurar su inocuidad.

The Paraguayan caña is the traditional alcoholic beverage of Paraguay and has an alcohol content of 35% (minimum) to 45% (maximum) by volume at 20 º C (35º to 45º Gay Lussac grades). It is prepared exclusively by the fermentation of sugar molasses (Saccharum officinarum) and obtained from the distillate with subsequent dilution. According to the Paraguayan Standard of caña NP 3001 84 (June/2010 Third Edition), the Paraguayan caña must have certain characteristics for human consumption. The spirit contains several volatile compounds with toxic and/or organoleptic actions with minimum and maximum parameters of acceptability. Among them, methanol has an allowed maximum concentration of 10 mg%, expressed in anhydrous alcohol (equivalent to 10 mg/dL). In order to contribute to the quality control of the Paraguayan caña, this study quantified methanol in samples of the beverage. The districts with the highest concentration of methanol in the caña in three departments of our country (Central, Cordillera and Paraguarí) and in the capital were identified. Methanol content was quantified by gas chromatography in the Laboratories of the Research and Technological Assistance Organism (OIAT in Spanish) of the National Institute of Technology, Standardization and Metrology (INTN in Spanish). The mean methanol content was 3.78 mg%(mg/dL) (SD:5.80 n: 48) and 6 out of 48 samples showed values over the maximum allowed value in districts from Cordillera and the capital. Other compounds of the Paraguayan caña must be quantified to evaluate the toxicity and ensure their safety and quality.

**Comparison of two Leishmania strains in an ELISA for the diagnosis of canine visceral leishmaniasi**

La leishmaniosis visceral es una enfermedad causada por protozoos del género Leishmania, afecta fundamentalmente al hombre y a los caninos, englobando un amplio espectro de procesos patológicos que parten desde cuadros cutáneos autocurables a viscerales con desenlace fatal. La leishmaniosis se conoce en Paraguay desde los años 1913; y se observa un aumento de los casos en paralelo al proceso de deforestación y expansión agrícola. La infección en los caninos es causada por parásitos del género Leishmania complejo L. donovani, especies L. infantum en el viejo mundo y L. chagasi en el nuevo mundo. Entre las técnicas de diagnóstico serológico se destacan la aglutinación directa (DAT), la inmunofluorescencia indirecta (IFI), el ELISA, la inmunocromatografía y el inmunoblotting. La sensibilidad y especificidad de cada una de ellas dependen en gran medida del antígeno utilizado. Sin embargo, pocos análisis comparativos se han hecho con tests que utilizan diferentes antígenos para identificar el mejor antígeno. El trabajo realizado fue un estudio analítico que tuvo como objetivo comparar a las dos cepas de leishmania: L. chagasi y L. donovani utilizadas en el ELISA indirecto para el diagnóstico serológico de leishmaniosis visceral canina que se realiza en el IICS. Del total de muestras analizadas, 173/185 (94%) resultaron concordantes. Utilizando la prueba de ELISA con antígeno L. chagasi como referencia, el antígeno de L. donovani dio una positividad y negatividad del 92% y 100% respectivamente. Se obtuvo una excelente concordancia (Kappa 0.82) y una fuerte asociación de 125.29 (p<1x10-7) por chi2. Estos resultados sugieren que el antígeno L. donovani podría ser utilizado en el ELISA indirecto para la detección de anticuerpos anti-leishmania en caninos.

Visceral leishmaniosis is a disease caused by protozoa of the genus Leishmania. It mainly affects humans and canines, encompassing a wide spectrum of pathological processes from self-healing cutaneous cases to visceral cases with fatal outcome. Leishmaniosis is known in Paraguay since 1913, and there is an increase of cases in parallel to the process of deforestation and agricultural expansion. The infection in dogs is caused by parasites of the genus Leishmania: L. donovani complex, L. infantum species in the Old World and L. chagasi in the New World. Among serological diagnostic techniques, there are direct agglutination (DAT), indirect immunofluorescence (IIF), ELISA, immunochromatography and immunoblotting. The sensitivity and specificity of each test depend largely on the antigen used. However, few comparative analyses have been made in tests using different antigens to identify the best antigen. This work was an analytical study aimed to compare two strains of Leishmania: L. chagasi and L. donovani used in the indirect ELISA for the serological diagnosis of canine visceral leishmaniosis performed in the IICS. Of the samples tested, 173/185 (94%) were concordant. Using the ELISA with L. chagasi antigen as reference, the antigen of L. donovani gave a positivity and negativity of 92% and 100% respectively. An excellent agreement (Kappa 0.82) and a strong association of 125.29 (p <1x10-7) by chi2 were obtained. These results suggest that the antigen of L. donovani could be used in the indirect ELISA for the detection of anti-leishmania antibodies in dogs.

Knowledge, attitudes and practices on maternal syphilis among pregnant teenagers at National Reference Hospitals in Paraguay. 2008

La actividad sexual precoz expone ampliamente a la población adolescente al mayor peligro de padecer infecciones de transmisión sexual. En los últimos años ha ocurrido un incremento de la actividad sexual y una mayor precocidad del inicio de las mismas, provocando un aumento de la incidencia del embarazo adolescente. Esto se considera actualmente un serio problema médico-social. Estudio observacional descriptivo con componente analítico, cuyo objetivo fue determinar los conocimientos, actitudes y prácticas sobre sífilis materna de adolescentes embarazadas. Hospitales de Referencia de atención materna e infantil a nivel nacional ubicados en las ciudades de Asunción y San Lorenzo. Se realizó una encuesta en adolescentes acerca de los conocimientos, actitudes y prácticas sobre la infección por sífilis durante el embarazo en el año 2007 al 2008.Se obtuvo información de 146 adolescentes embarazadas de un grupo de 700 mujeres embarazadas en las cuales se identificó un 75% de desconocimiento sobre la sífilis. Respecto a la actitud favorable y la buena práctica, en ningún caso llegan al 50%. Se ha demostrado que en la medida que los conocimientos son buenos; las actitudes son favorables y las prácticas son de prevención. Esto indica la necesidad de educación a las adolescentes sobre la enfermedad, sus signos y síntomas, a quién y cómo afecta, como así también la información de que la sífilis tratada a tiempo, tiene cura.

Early sexual activity broadly exposes adolescent population to a greater risk of acquiring sexually transmitted infections. In recent years, there has been an increase in the sexual activity and an earlier beginning of it, causing thus an increase in the incidence of teenage pregnancy which is now considered a serious medical-social problem. This descriptive observational study with an analytic component was developed to determine knowledge, attitudes and practices on maternal syphilis of pregnant adolescents attending national reference hospitals of maternal and child care located in the cities of Asuncion and San Lorenzo. A KAP survey was conducted among adolescents regarding syphilis infection during pregnancy from 2007 to 2008. Information was obtained from 146 pregnant adolescents in a group of 700 pregnant women in which 75% did not have any knowledge about syphilis. Regarding a favorable attitude and good practice, the percentage did not achieve 50% in any case. It has been shown that as good as knowledge is, attitudes are favorable and practices are preventive. These results indicate the need of educating adolescents about the disease, signs and symptoms, to whom and how it affects, as well as the information that if syphilis is treated early, it can be cured.

Queratitisdue to Nocardia brasiliensis.First reportin Paraguay

La queratitis producida por Nocardia spp es raramente reportada en el mundo por lo que su incidencia no está aún bien establecida. En el presente estudio se reporta el primer caso de queratitis por Nocardia brasiliensis en Paraguay en un paciente de sexo masculino, de profesión jardinero, procedente de la ciudad de Asunción, y con antecedente de traumatismo con rama de arbusto quince días antes de la consulta. El paciente acude al servicio de Oftalmología del Hospital de Clínicas, debido a ojo rojo, agudeza visual disminuida e intenso dolor en el ojo izquierdo con una semana de evolución. Se realiza tratamiento con la aplicación de colirio reforzado de gentamicina 14 mg/ml y cefazolina 50 mg/ml, cada una hora, observándose mejoría de los síntomas y de la agudeza visual a los 10 días de seguimiento. La evolución clínica en queratitis a Nocardia spp es buena siempre que el diagnóstico etiológico se realice sin demora y correctamente. Es muy importante diferenciar los bordes de las lesiones de la úlcera de córnea producidas por hongos, bacterias filamentosas y otras bacterias, además considerar la presencia de lesiones satélites.

Keratitis caused by Nocardia species is rarely reported in the world and therefore, its impact is not yet well established. The present study reports the first case of keratitis by Nocardia brasiliensis in Paraguay in a male patient, a gardener from Asuncion with a history of trauma with a bush branch two weeks before consultation. The patient came to the Department of Ophthalmology of the Hospital de Clinicas because of a red eye, decreased visual acuity and intense pain in the left eye with a week of evolution. The treatment was performed with the application of reinforced eye drops of gentamicin 14 mg/ml and cefazolin 50 mg/ml, every one hour. Improvement of the symptoms and visual acuity was observed at 10 days of follow-up. The clinical outcome of Nocardia spp keratitis is good as long as the etiologic diagnosis is made promptly and correctly. It is very important to distinguish the borders of the lesions of the corneal ulcer caused by fungi, filamentous bacteria and other bacteria apart from considering the presence of satellite lesions.

Impact of the oxidative stress on cutaneous lesions caused by ionizing radiations

Los efectos inducidos por exposición de manera accidental o terapéutica a dosis de radiaciones ionizantes inducen varios eventos celulares que afectan el proceso de cicatrización de la piel, y tiene gran impacto en la prognosis y supervivencia de individuos afectados. La información existente sobre los efectos nocivos por altas exposiciones a radiaciones proviene a partir de los accidentes ocurridos por las bombas atómicas en Hiroshima y Nagasaki produciendo problemas de salud por leucemias y linfomas en los sobrevivientes. El síndrome de radiación aguda (SRA) generalmente inicia durante las dos horas inmediatas posteriores a la exposición, y la severidad de las lesiones depende de la dosis y del tiempo de exposición. El desarrollo de las lesiones por el daño como efectos tardíos a exposiciones por radiaciones es más complejo y determina no únicamente el daño al parénquima celular sino también se presentan daños en el tejido vascular y en otros tejidos de soporte. Al menos parcialmente estos eventos se presentan a consecuencia del estrés oxidativo generado por el excesivo incremento de especies reactivas del oxígeno (EROs). Se han estado estudiando componentes comerciales como blancos potenciales para la prevención de los daños causados por radiaciones en piel que tienen una amplia actividad contra múltiples citocinas involucradas en los procesos de la lesión cutánea y por otro lado se están estudiando fármacos que reaccionan con los radicales libres o indirectamente inhiben la expresión de las enzimas que generan la producción de EROs o bien aumentan la expresión de enzimas antioxidantes intracelulares.

The effects caused by accidental or therapeutic exposure to doses of ionizing radiations induce several cellular events that affect the process of skin healing, and have great impact in the prognosis and survival of affected individuals. The existing information on the harmful effects of exposures to high radiation doses comes from the survivors of the Hiroshima and Nagasaki nuclear bombs who developed health problems such as leukemia and lymphoma. The acute radiation syndrome (ARS) initiates generally after two hours of the body exposure to the radiation, and the severity of the lesions depends on the dose and time of exposure. The development of the lesions as late effects of radiation exposure is more complex and determines not only the damage to the cell parenchymabut also changes the characteristics within the vascular tissues and other supporting tissues. At least partially, these events appear as result of the oxidative stress generated by the excessive increase of reactive oxygen species (ROS). Commercial compounds are being studied as potential targets for the prevention of the damages caused by radiations in the skin that have wide activity against multiple cytokines involved in the process of the cutaneous lesion. On the other hand, some drugs are being studied that react with the free radicals, indirectly inhibit the expression of the enzymes that generate the production of ROS or increase the expression of intracellular antioxidant enzyme expression.

Visceral leishmaniosis: 101 years from the first case diagnosed in the Americas

En 2011 se cumplieron, desapercibidamente, 100 años del descubrimiento del primer caso de leishmaniosis visceral en toda América, realizado por el Dr. Migone. Ahora es aún ocasión de conmemorar ese hito histórico, y de hacer una reflexión de la situación actual de la enfermedad en nuestro país, con profuso material de referencias bibliográficas.

In 2011, it has been 100 years since the discovery of the first case of visceral leishmaniasis in the Americas made by Dr. Luis Migone, a fact that was unnoticed. However, it is still time to commemorate this historic milestone and reflect on the current situation of the disease in our country with abundant material of bibliographic references.