Memorias del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud

Anatomopathological diagnosis of hairy cell leukemias in Paraguay

La leucemia a células peludas o tricoleucemia es una entidad dentro de los síndromes linfoproliferativos crónicos, con características propias que la hacen distinta a las demás neoplasias linfoides. Es una leucemia crónica caracterizada por un curso clínico indolente y prolongado, con esplenomegalia marcada, pancitopenia y presencia de células linfocíticas peludas características en sangre periférica, médula ósea y bazo. El diagnóstico de esta enfermedad no siempre es fácil desde el punto de vista clínico-hematológico, debido a sus características propias que impiden buenas extracciones citológicas para visualización correctas de sus células, por lo que necesita en la mayor parte de los casos una confirmación diagnóstica anatomopatológica complementada con técnicas especiales. El objetivo de este trabajo es describir los aspectos morfológicos de esta patología desde el punto de vista anatomopatológico, tanto en su carácter citológico como histológico, con las diferentes técnicas especiales que se utilizan para diagnóstico actualmente en hematopatología en el Paraguay, correlacionando estos hallazgos con la clínica y laboratorio hematológicos, esquemas terapéuticos utilizados, respuesta y evolución de los pacientes. Los materiales citológicos y biópsicos de estos pacientes se analizaron en la Sección de Patología Hematológica del Departamento de Patología del Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud (IICS-UNA) de Asunción-Paraguay en un período de tiempo de cinco años, desde su creación en 1997 hasta el año 2002, con técnicas de citohistoquímica enzimática en citologías y cortes de parafina, la inmunohistoquímica y microscopía electrónica de transmisión y barrido. Estos incluyen materiales de biopsias de médula ósea, aspirados e improntas medulares, sangre periférica, esplenectomías y cuñas de hígado de 7 casos consecutivos encontrados dentro de los 53 pacientes con síndrome linfoproliferativo crónico de los principales centros asistenciales del país. En este trabajo se pone de manifiesto la importancia que tiene la anatomía patológica y sus técnicas especiales en hematopatología, especialmente la biopsia de médula ósea, para llegar al diagnóstico final de certeza, en este caso, de la leucemia a células peludas. Por medio de ella es posible evidenciar cambios y alteraciones morfológicas tanto celulares como tisulares que en primer lugar confirman el diagnóstico, en segundo lugar analizan los criterios para el pronóstico y en tercer lugar evalúan la respuesta terapéutica de estos pacientes.

Hairy cell leukemia or tricholeukemia is an entity within chronic lymphoproliferative syndromes with own characteristics different from those of other lymphoid neoplasias. It is a chronic leukemia characterized by an indolent and long clinical course, marked splenomegaly, pancytopenia and presence of characteristic hairy lymphocytic cells in peripheral blood, bone marrow and spleen. The diagnosis of this disease is not always easy from the clinico-hematologic point of view because of its own characteristics that avoid good cytologic extractions for a correct visualization of its cells. Due to this, a diagnostic anatomopathological confirmation complemented with special techniques is necessary in most cases. The objective of this study is to describe the morphological aspects of this pathology from the anatomopathological point of view, in its biological and histological character with the different special techniques used currently for diagnosis in hematopathology in Paraguay. Findings were then correlated with hematologic clinics and laboratory, therapeutic schemes used, response and evolution of patients. The cytological and biopsy materials were analysed in the Section of Hematologic Pathology, Department of Pathology, Health Sciences Research Institute (IICS, National University of Asuncion), during five years, since its creation in 1997 to 2002, using enzymatic cytohistochemical techniques in cytologies and paraffin cuts, immunohistochemistry, transmission and scan electronic microscopy. These materials include samples from bone marrow biopsies, aspirates and imprints, peripheral blood, splenectomies and liver wedge of seven consecutive cases found in 53 patients with chronic lymphoproliferative syndrome of the main hospitals of the country. This work remarks the importance of pathological anatomy and its special techniques in hemotopathology, mainly the bone marrow biopsy, to achieve a certainty final diagnosis in hairy cell leukemias. It is possible to evidence morphological cell and tissue changes as well as alterations that confirm the diagnosis in first place, analyse the prognosis criteria in second place and finally evaluate the therapeutic response of these patients.

Evaluation of the scientific-laboratory equipment of the National University of Asunción

RESUMEN El propósito del estudio es diagnosticar la calidad de funcionamiento de los equipos laboratoriales y el gerenciamiento tecnológico practicado en los laboratorios de la Universidad Nacional de Asunción (UNA). La población de estudio (n=246 equipos) se definió en base a criterios de instalación, funcionamiento y utilización adecuada de un grupo de 46 tipos diferentes de equipos laboratoriales correspondientes a siete Facultades y cuatro Institutos de Investigaciones y Servicios especializados. Con cuestionario estandarizado se evaluaron 5 parámetros predeterminados de calidad de funcionamiento de los equipos. El análisis de datos se realizó con estadística descriptiva y la hipótesis se probó con estadística no paramétrica para variables cualitativas (chi-cuadrado). De los 246 equipos seleccionados, 56,1% correspondió a laboratorios de docencia / investigación y 43,9% a servicios. El nivel máximo de calidad alcanzado fue de "regular", que varió de 90,7% a 84,6% del total de equipos evaluados para los parámetros condición general y eléctrica respectivamente. El nivel de "deficiente" varió de 9,3% a 15,4% para los mismos parámetros. El mantenimiento realizado en el 78,5% de los equipos fue solo correctivo y en el 21,5% “a demanda”. No se observaron diferencias significativas de calidad de equipos entre los laboratorios (RR: 1,49 a 1,79), pero sí entre los dos tipos de mantenimiento practicado en los equipos (RR: 6,24 a 24,28; p < 0,0001). En conclusión, este estudio demuestra que el bajo nivel de calidad de funcionamiento de los equipos laboratoriales es atribuible a la deficiente gestión para el mantenimiento y control de calidad de los mismos.

The purpose of this study was to diagnose the operating quality of the laboratory equipment and the technological management performed at the laboratories of the National University of Asuncion (UNA). The study population (n = 246 units) was defined by criteria of installation, operation and adequate usage of a group of 46 different types of laboratory equipment from seven faculties and four research and specialised service institutes. Using a standardised questionnaire, five pre¬determined parameters of equipment quality were evaluated. Data analysis was done by descriptive statistics and the hypothesis was tested with non-parametric statistics for qualitative variables (chi-square). On 246 selected equipment units, 56.1% corresponded to teaching/research laboratories and 43.9% to services. The maximum quality level reached was "regular" going from 90.7 % to 84.6% out of the total number of evaluated equipment units for the parameters general condition and electric condition respectively. The level of "deficient" varied from 9.3% to 15.4% for the same parameters. The maintenance performed in 78.5% of the equipment was only corrective and in 21.5% “on demand”. Significant differences were not observed in equipment quality between laboratories (RR: 1.49 to 1.79) but there was a significant difference between the two types of maintenance performed in the equipment units (RR: 6.24 to 24.28; p < 0.0001). In conclusion, this study shows that the low level of operation quality of laboratory equipment is attributable to the defective management of maintenance and quality control of the equipment units.

Nasal carriage of staphylococcus aureus in hospital staff. Frequency and ntimicrobial sensitivity pattern

RESUMEN El Staphylococcus aureus (Sau) es un agente frecuente de infecciones en lactantes y niños, siendo la fuente usual de la infección la colonización de las fosas nasales. La diseminación del microorganismo en el contexto nosocomial ocurre por aerosolización y por contacto interpersonal entre el personal hospitalario y los pacientes. En el presente estudio se determinó la prevalencia de portadores nasales de Sau en el personal hospitalario de la Cátedra de Pediatría del Hospital de Clínicas (CPHC), del Centro Materno Infantil de la UNA (CMI) y del Hospital Santísima Trinidad del MSP y BS (HST), además se determinó el patrón de sensibilidad a los antimicrobianos de las cepas aisladas. Las muestras se recolectaron por hisopado nasal, transportados en medio Stuart al laboratorio de Microbiología del IICS para su cultivo en agar sangre de carnero al 5% e incubación a 35°C en atmósfera de CO por 48 hs. La identificación del Staphylococcus aureus se realizó por métodos 2 convencionales y la sensibilidad a los antimicrobianos se determinó según normas estandarizadas. La prevalencia de portación nasal de Sau en 141 individuos del personal hospitalario fue de 31% (n=45), distribuidos en 38% (13/34) para el HST, 32% (17/53) para la CPHC y 15/54 (27%) para el CMI. De las 43 cepas, 42 (98%) fueron resistentes a penicilina, 12 (28%) a gentamicina, 12 (28%) a eritromicina, 9 (21%) a oxacilina, 4 (9%) a rifampicina, 2 (5%) a cotrimoxazol, y 1 (2%) a ciprofloxacina. La portación de Sau en el personal hospitalario es frecuente, por lo que el lavado cuidadoso de manos, y el uso de medidas profilácticas e higiénicas tienen una importancia fundamental para evitar que la infección se disemine.

ABSTRACT Staphylococcus aureus (Sau) is a frequent agent of infections in breast feeding babies and children being the colonization of nasal fossas the usual infection source. The microorganism dissemination in a hospital context occurs by aerosolization and interpersonal contact between hospital staff and patients. This study determined the prevalence of nasal carriers of Sau in the hospital staff of the Professorship of Pediatrics of the Hospital de Clínicas (CPHC), the Maternal-Child Center of the National University of Asuncion (CMI) and the Hospital Santísima Trinidad of the Ministry of Health and Public Welfare (HST). The sensitivity pattern to antimicrobials of the isolated strains was also evaluated. Samples were collected by nasal swabbing, transported in Stuart medium to the laboratory of Microbiology of the IICS, cultured in 5% sheep blood agar and incubated at 35°C in CO environment for 48 hs. Identification of Staphylococcus aureus was carried out by conventional methods and the 2 antimicrobial sensitivity was determined according to standardised guidelines. The prevalence of Sau nasal carriage in 141 subjects of the hospital staff was 31% (n=45), distributed in 38% (13/34) in the HST, 32% (17/53) in the CPHC and 27% (15/54) in the CMI. Of the 43 strains, 98% (42) was resistant to penicillin, 28% (12) to gentamicin, 28% (12) to erythromycin, 21% (9) to oxacillin, 9% (4) to rifampicin, 5% (2) to cotrimoxazole and 2% (1) to ciprofloxacin. Sau carriage in hospital staff is frequent. Therefore, the careful hand washing and use of prophylactic and hygienic measurements have major importance to avoid the dissemination of infections.

Recto-vaginal carriage of group B beta hemolytic streptococcus in pregnant women of the Child Maternal Center Infantil and Hospital Santisima Trinidad

RESUMEN El estreptococo betahemolítico del grupo B (SGB) es la causa principal de infección neonatal grave en los Estados Unidos. El CDC desarrolló una estrategia para reducir la morbilidad y mortalidad de las enfermedades neonatales asociadas al SGB, recomendando el cultivo de muestras recto-vaginal de todas las mujeres entre las 35 a 37 semanas de gestación. En el Paraguay no se indica la búsqueda de esta bacteria en forma rutinaria y no hay trabajos que indiquen la prevalencia de SGB en embarazadas en nuestro medio. Es importante identificar portadoras de SGB y ofrecer profilaxis antibiótica durante el parto a las mujeres portadoras de SGB y a aquellas que desarrollan ataque prematuro de parto o ruptura de membranas antes de las 37 semanas de gestación. El presente trabajo tuvo como objetivo determinar la prevalencia de portación recto-vaginal de mujeres embarazadas que acudieron a dos servicios de consulta prenatal (Centro Materno Infantil y Hospital Santísima Trinidad). Las muestras se recolectaron por hisopado vaginal y rectal, y transportadas en medio Stuart al laboratorio de Microbiología del IICS para su cultivo en medio de agar sangre de carnero al 5% e incubación a 35°C en 7% de CO por 48 hs. El SGB se identificó por 2 métodos convencionales y la sensibilidad a los antimicrobianos se determinó según normas estandarizadas de NCCLS. La prevalencia de portación rectovaginal fue de 12% (15/121), distribuida en 17% (9/52) para el HT y 8% (6/69) para el CMI. Los resultados obtenidos son similares a lo registrado en la literatura internacional y podrían ser aun más elevadas si se utilizan medios selectivos recomendados por el CDC.

ABSTRACT The group B beta hemolytic streptococcus (SGB) is the main cause of severe neonatal infection in USA. The CDC developed a strategy to reduce morbidity and mortality of neonatal diseases associated to SGB recommending the culture of recto-vaginal samples of all women between 35th and 37th pregnancy weeks. In Paraguay, the search of this bacteria is not indicated routinely in all hospitals and there are not studies indicating SGB prevalence in pregnant women. It is important to identify SGB carriers and offer antibiotic prophylaxis to SGB carrier women during delivery as well as to those who develop delivery premature attacks or membrane breakage before 37th pregnancy week. The objective of this study was to determine the prevalence of recto-vaginal SGB carriage in pregnant women who attended two prenatal consultation services (Child Maternal Center and Hospital Santísima Trinidad). Samples were collected by vaginal and rectal swabbing and transported in Stuart medium to the Laboratory of Microbiology of the IICS for culture in agar- 5% sheep blood medium and incubation at 35°C in 7% of CO2 for 48 hs. SGB was identified by conventional methods and sensitivity to antimicrobials was determined by standardised guidelines of NCCLS. The prevalence of recto-vaginal carriage was 12% (15/121), distributed as follows: 17%(9/52) in the HT and 8% (6/69) in the CMC. The results were similar to those previously reported and could be higher if selective media recommended by CDC are used.

Immune response to an oral vaccine (CVD 103 HGR - BERNA -SWITZERLAND) against cholerain paraguayan volunteers

RESUMEN El cólera continúa siendo un importante problema de salud pública en países en vías de desarrollo. En 1.998, más de 1.000.000 de casos fueron notificados en América Latina. Paraguay ha reportado cuatro casos hasta ahora. La epidemia ha enfocado la atención al desarrollo de una vacuna segura, efectiva y de larga duración. Una vacuna oral viva atenuada, la CVD 103 HgR (serotipo Inaba, biotipo Clásico, Berna-Suiza) ha sido licenciada en varios países, incluido el Paraguay. Este estudio fue desarrollado para evaluar la seguridad e inmunogenicidad de la vacuna CVD 103-HgR en voluntarios paraguayos. Cuarenta voluntarios adultos, sanos, fueron reclutados en Asunción-Paraguay para recibir una dosis oral (2-6 x 10cfu) de la vacuna CVD 103-HgR. Las muestras de sueros fueron obtenidas antes de la vacunación, a los 15 y a los 30 días después de la misma. Se midieron los niveles de inmunoglobulinas IgG, IgA e IgM de los voluntarios, los anticuerpos vibriocidas y los anticuerpos anti-LPS. La vacuna fue bien tolerada y so se observó enfermedad diarreica en el estudio. Veintisiete (67.5%) de los 40 voluntarios desarrollaron anticuerpos vibriocidas. Ninguno tuvo títulos iniciales, 8 (20%) tuvieron títulos recíprocos de 320 y sólo 5 (12.5%) alcanzaron títulos iguales o mayores que 5.120. En la medición de los anticuerpos anti-LPS no hubo respuesta significativa. Este es el primer estudio sobre evaluación de una vacuna oral contra el cólera. Estos resultados muestran que los voluntarios paraguayos desarrollan respuesta de anticuerpos vibriocidas. Esta vacuna podría ser efectiva contra el cólera en nuestro país.

ABSTRACT Cholera remains as an important public health problem in underdeveloped countries. In 1998, more than 1,000,000 cases were notified in Latin America. Paraguay has reported four cases until now. The epidemic has focused the attention to the development of a safe, effective and long lasting cholera vaccine. A live oral attenuated CVD 103-HgR (Inaba serotype, Classical biotype) has been licensed in several countries, including Paraguay. To evaluate the safety and immunogenicity of CVD 103-HgR in Paraguayan volunteers, an study was performed. Forty healthy adults, were recruited in Asuncion, Paraguay to receive a single oral dose (2-6 x 109 cfu) of CVD103-HgR). Serum samples were obtained before, 15 and 30 days alter vaccination. The level of IgG, IgA and IgM antibodies was measured in serum of the volunteers as well as the level of vibriocidal and anti-LPS antibodie. The vaccine was well tolerated and no diarrhea illness was observed in the study. Twenty seven (67.5%) of the 40 volunteers developed serum vibriocidal antibodies. None had vibriocidal titers at baseline, eight (20%) had a reciprocal titer of 320 and only five (12.5%) reached titers equal or higher than 5,120. In the measurement of anti-LPS antibodies, there were not significative results. This is the first study of evaluation of an oral vaccine against cholerae. These results show that the Paraguayan volunteers developed a vibriocidal antibody response. This vaccine could be effective against cholera in our country.

Haematological values of blood donors in Asunción, Paraguay

RESUMEN El presente trabajo tuvo como objetivo determinar los valores hematológicos en una población de donantes de sangre, aparentemente sanos, provenientes de áreas urbanas y rurales. El estudio se realizó en 133 individuos, adultos de ambos sexos, entre 18 y 60 años de edad, que cumplieron con los criterios clínicos deseables en donantes y que asistieron a cinco bancos de sangre de Asunción Paraguay. Se estudiaron los siguientes parámetros: hemoglobina, hematocrito, glóbulos rojos, volumen corpuscular medio, hemoglobina corpuscular media, concentración de hemoglobina corpuscular media, glóbulos blancos y plaquetas. La diferencia entre ambos sexos fue estadísticamente significativa para hemoglobina, hematocrito, glóbulos rojos y concentración de hemoglobina corpuscular media, (p< 0,05). Los valores hematológicos obtenidos en esta población, para la serie roja, se encuentran dentro de los rangos referidos en la literatura para altitudes similares a la de Paraguay. En cuanto a los glóbulos blancos, presentaron valores semejantes tanto los varones como las mujeres; en relación al recuento plaquetario, el rango en mujeres fue ligeramente inferior al reportado en la literatura.

ABSTRACT This study aimed to determine the hematological values of a population of blood donors from urban and rural areas. It was carried out on 133 apparently healthy adults of both sexes, aged between 18 and 60 years old, who fulfilled the clinical desirable criteria to be donors who attended five blood banks in Asunción, Paraguay. The following parameters were studied: hemoglobin, hematocrit, red blood cells, white blood cells, platelet counts, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin and mean corpuscular hemoglobin concentration. The difference between sexes for hemoglobin, hematocrit, red cell count and mean corpuscular hemoglobin concentration was statically significant (p< 0,05). Hematological values for red series found in this population were in the normal range reported by other studies for altitudes similar to that of Paraguay. White blood cells values in men and women were similar. Concerning platelet count, the range of women was slightly lower than the one reported by the literature.